旋转式核酸提取仪的工作原理主要基于磁珠吸附法,以下是其工作流程的关键步骤:
1、样本裂解:样本被加入到含有裂解液的容器中,裂解液中的化学成分可以破坏细胞和病毒的壁,从而释放出核酸。
2、核酸吸附:释放出的核酸与磁珠结合。磁珠被设计成可以在高盐低pH值下吸附核酸,在低盐高pH值下与核酸分离。
3、磁珠洗涤:吸附了核酸的磁珠被转移到含有洗涤液的孔中,洗涤液用于去除蛋白质、多糖和其他杂质。
4、核酸洗脱:洗涤干净的磁珠被转移到含有洗脱液的孔中,核酸从磁珠上洗脱,通常使用水或低盐缓冲液进行。
5、磁珠转移:利用实验舱磁棒架上的磁棒,将吸附有核酸的磁珠移动至不同的试剂孔内。
6、混合匀化:通过套在磁棒外层的磁棒套,反复快速的混匀液体,使液体与磁珠均匀混合。
7、自动化控制:旋转式核酸提取仪通过精密的机械装置和程序化的控制来完成核酸的结合、洗脱和纯化步骤。
8、温度控制:根据实验需求自定义裂解和洗脱温度,以优化提取效率和核酸质量。
9、污染控制:旋转式提取法比起拍打法可杜绝交叉污染和紫外消毒功能,严格控制孔间污染及批次间污染。
10、高纯度提取:配合精确的温育时间,实现了更高的提取效率,提取的DNA/RNA纯度高,可以直接用于PCR和RT-PCR。